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小編的世界 優質文選 科學

在生命科學科研實驗中,如何表達一段基因(蛋白質)進行研究


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2020年12月13日 -
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拉米的科研秘籍

01

找基因

先到生物信息學網站找到這段基因,下載下來,通過生物信息學分析軟件分析,設計配對的引物和酶切位點。把序列發給生物公司,讓生物公司合成

02

擴增這段基因

合成的基因是可以用過儀器進行擴增的,加上酶和引物、原料,用自動調溫的PCR儀器就可以擴增這段基因了

03

處理這段基因

可以給這段基因加上能夠連接到載體的途徑,用酶切割一下,修飾一下,這樣就能連接上載體了,載體上也用酶切割修飾,正好能和這段基因連接起來了。

04

連接基因的載體在生物體內克隆

如果載體是質粒,就可以放進細菌裏,讓他複制了,載體質粒帶有抗藥性,這樣用藥物就能篩選出接受了質粒作為自己一部分的細菌了。

05

把克隆後的載體質粒提取出來

用試劑分解細菌,把細菌裏的成分,用試劑溶解,離心,反複用不同試劑溶解,經過過濾柱吸附,直到純化出需要的質粒

06

讓基因表達出來

把提取得質粒,通過試劑,讓它進入細胞裏,它就能利用基因裏的遺傳密碼合成蛋白質了,完工。